میکروبیولوژی
تستCAMP
– هدف :
شناسایی و افتراق استرپتوکوک گروه B ( آگالاکتیه ) از سایر استرپتوکوکها
۲- اساس آزمایش :
استرپتوکوک گروه B پروتئین خارج سلولی به نام CAMP factor ترشح می نماید که با بتا لیزین استافیلوکوک ارئوس بصوررت سینرژیک عمل نموده وسبب افزایش لیز گلبول های قرمز خون می شود.
- حساسیت این تست بسیار بالا است و حتی سویه های بدون همولیز استرپتوکوک گروه B (در۱۱ % موارد )، CAMP مثبت می باشند.
۳- نمونه اولیه :
– کشت تازه میکروبی ( ۲۴-۱۸ ساعته )
۴- مواد و ابزار لازم :
- پلیت بلاد آگار حاوی ۵% خون گوسفند
- استاف اورئوس بتا همولیتیک ATCC (25923 ) یا استاف اورئوس بتا همولیتیک جدا شده از بیمار
۵- روش انجام کار :
- ابتدا در وسط پلیت بلادآگار یک خط مستقیم از استاف اورئوس مولد بتا لیزین راکشت می دهیم.
- سپس استرپتوکوک مورد نظر را عمود بر خط کشت استاف ارئوس کشت داده بطوریکه این دو با هم برخورد و تداخل نکنند. (می توان چند میکروار گانیسم را به فاصله ۴-۳میلیمتر کشت داد.)
- پلیت را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در اتوو C ۳۵۰ در حضور O2 انکوبه می نماییم.
- مشاهده همولیز بتا، شبیه نوک فلش، در محلی که دوسویه استاف اورئوس و سویه مشکوک به هم نزدیک می شوند، نشان دهنده تشدید همولیز بتا و تست CAMP مثبت است.
۶-تداخلات :
اگر پلیت تست در کندل جار یا اتو CO2 و یا در شرایط بی هوازی انکوبه شود بعضی از استرپتوکوک های گروه A ایجاد واکنش CAMP مثبت می کنند، بنابراین پلیت تست، باید حتماً در حضور O2 اتوو گذاری شود.
۷- برنامه QC :
سویه کنترل مثبت : استرپتوکوک گروه B
سویه کنترل منفی : استرپتوکوک گروه A و استرپتوکوک Bovis