میکروبیولوژی

روش رنگ آمیزی منفی باکتری ها (Negative Staining)

در این روش ، از رنگی استفاده می شود که فقط زمینه لام را رنگ کند و خود باکتری رنگ نمی گیرد. یعنی زیر میکروسکپ، زمینه لام رنگی بوده و باکتری ها به صورت اجسامی شفاف در این زمینه ، مشاهده می شوند. مزیت این روش نسبت به روشهای دیگر این است که شکل میکروب ها در اثر اضافه شدن رنگ ها تغییر نمی کند و میکروارگانیسم های مورد مطالعه به اندازه طبیعی خود مشاهده می شوند. رنگ هایی که خاصییتی این چنین دارند عبارتند از نیگروزین ، مرکب چین و قرمز کنگو که نیگروزین و مرکب چین سیاه رنگ بوده و باعث تیره شدن زمینه لام می شوند و قرمز کنگو نیز باعث قرمز شدن زمینه می گردد که در اثر افزودن اسید می تواند به رنگ آبی نیز مشاهده شود.

الف- روش رنگ آمیزی باکتری با نیگروزین

مقدار یک گرم نیگروزین  را در ۱۰۰ میلی لیتر آب مقطر حل و صاف نموده بعد ۵/۰ % فرمالین بعنوان نگهدارنده به اضافه می کنیم .

  • ابتدا قطره کوچکی از رنگ نیگروزین را روی لام تمیز و خشک قرار دهید.
  • با فیلدوپلاتین مقدار کمی از کلنی استافیلوکوکوس را برداشته و در قطره نیگروزین حل نموده گسترش تهیه کنید.
  • صبر کنید تا گسترش خشک شود.
  • با عدسی ۱۰۰ و روغن ایمرسیون لام تهیه شده را مشاهده نمایید.

تذکر۱: آزمایش فوق را باکلنی باسیلوس سوبتیلیس و کلبسیلا انجام دهید.

تذکر ۲: می توانید به جای نیگروزین از مرکب چین استفاده نمایید.

 

 رنگ آمیزی منفی- روش نیگروزین

 

 

روش رنگ آمیزی باکتری  با رنگ قرمز کنگو

  • ابتدا قطره ای از قرمز کنگو را روی لام تمیز و خشک قرار دهید.
  • با فیلدوپلاتین مقدار کمی از کلنی های باکتری های فوق را برداشت نموده در قطره قرمز کنگو حل نموده و گسترش تهیه کنید.
  • صبر کنید تا گسترش خشک شود.
  • روی لام محلول ۱% اسید کلریدریک در الکل بریزید سپس لام را سرازیر کنید و بدون اینکه لام را شستشو دهید صبرکنید تا لام خشک شود.
  • با عدسی ۱۰۰ و روغن ایمرسیون لام تهیه شده را مشاهده نمایید.
برچسب ها

نوشته های مشابه

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

بستن