دستهبندی نشدهمیکروبیولوژی
روش انجام تستCAMP
– هدف :
شناسايي و افتراق استرپتوكوك گروه B ( آگالاكتيه ) از ساير استرپتوكوكها
۲- اساس آزمايش :
استرپتوكوك گروه B پروتئين خارج سلولي به نام CAMP factor ترشح مي نمايد كه با بتا ليزين استافیلوکوک ارئوس بصوررت سينرژيك عمل نموده وسبب افزايش ليز گلبول هاي قرمز خون مي شود.
- حساسيت اين تست بسيار بالا است و حتي سويه هاي بدون هموليز استرپتوكوك گروه B (در۱۱ % موارد )، CAMP مثبت مي باشند.
۳- نمونه اوليه :
– كشت تازه ميكروبي ( ۲۴-۱۸ ساعته )
۴- مواد و ابزار لازم :
- پليت بلاد آگار حاوي ۵% خون گوسفند
- استاف اورئوس بتا هموليتيك ATCC (25923 ) يا استاف اورئوس بتا هموليتيك جدا شده از بيمار
۵- روش انجام كار :
- ابتدا در وسط پليت بلادآگار يك خط مستقيم از استاف اورئوس مولد بتا ليزين راكشت مي دهيم.
- سپس استرپتوكوك مورد نظر را عمود بر خط كشت استاف ارئوس كشت داده بطوريكه اين دو با هم برخورد و تداخل نكنند. (مي توان چند ميكروار گانيسم را به فاصله ۴-۳ميليمتر كشت داد.)
- پليت را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در اتوو C ۳۵۰ در حضور O2 انكوبه مي نماييم.
- مشاهده هموليز بتا، شبيه نوك فلش، در محلی که دوسويه استاف اورئوس و سويه مشكوك به هم نزديک می شوند، نشان دهنده تشديد هموليز بتا و تست CAMP مثبت است.
۶-تداخلات :
اگر پليت تست در كندل جار يا اتو CO2 و يا در شرايط بي هوازي انكوبه شود بعضي از استرپتوكوك هاي گروه A ايجاد واكنش CAMP مثبت مي كنند، بنابراين پليت تست، بايد حتماً در حضور O2 اتوو گذاري شود.
۷- برنامه QC :
سويه كنترل مثبت : استرپتوكوك گروه B
سويه كنترل منفي : استرپتوكوك گروه A و استرپتوكوك Bovis